实施例2

表面张力测试：采用白金板测定菌株发酵上清液的表面张力。

将解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌剂（解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1数量比混合）分别接种于LB液体培养基中，在28~30℃条件下振荡培养发酵，直至发酵液中菌落浓度达到108～109

cfu/mL。

分别取上述各组30 mL发酵菌液，10000×g室温离心10 min，取各组发酵上清液，利用榴莲视频APP下载最新版本测定各组发酵液的表面张力，测定3次，取平均值，测试结果如表1所示。

表面张力是洗油剂对原油洗脱能力的重要指标，数值越低、洗脱能力越强。测试结果显示解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8发酵上清液均能降低表面张力，混合菌剂发酵上清液的表面张力值更低。

实施例3

界面张力测试：在45℃下，采用TX500C界面张力仪测定菌株发酵上清液与原油间的界面张力。

将解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌剂（解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1数量比混合）分别接种于LB液体培养基中，在28~30℃条件下振荡培养发酵，直至发酵液中菌落浓度达到108～109cfu/mL。

分别取上述各组30 mL发酵菌液，10000×g室温离心10 min，取各组发酵上清液，在45℃下，用TX500C界面张力仪进行测定，另取同体积的LB液体培养基作为空白组。当连续3次读数之差在10-3m N/m之内时，即可认为测定的体系已经达到平衡状态，记录最终的界面张力，测试结果如表2所示。

从表2实验结果中可以看出与空白相比解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8的界面活性好，油水界面低至1.92 mN/m和1.90mN/m，为低界面张力水平。混合菌剂的界面活性更为突出，低至0.68mN/m。

实施例4

洗油实验：

将原油与石英砂按照质量比为1∶5搅拌均匀制备油砂，放入60℃烘箱中老化24 h，取出密封备用。

将解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌剂（2组，解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens

）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1和3:2数量比混合）分别接种于LB液体培养基中，在28~30℃条件下振荡培养发酵，直至发酵液中菌落浓度达到108～109cfu/mL。

分别将上述各组30 mL发酵液倒入不同的离心管中，另取同体积30 mLLB液体培养基作为空白组；然后各离心管分别放入上述经过老化的15g的油砂（初始油砂含油量为2.5g），密封，均匀震荡5次后，放入60℃烘箱静置，24 h后取出。倾倒尽上层液体后，用20~25℃蒸馏水反复冲洗至水相无色，并收集合并冲洗液。

再将油砂烘干进行称量（离心管+油砂），质量为m1，离心管的质量为m0。

洗油效率η通过如下公式进行计算：

η=(15-(m1-m0))/2.5

各组洗油效率测试结果如表3所示，解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8发酵液均具有优秀的洗油效率，本发明混合菌剂的洗油效率更为优异，分别达到84.39%和93.32。

综合实施例1~4的测试结果说明解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8均可作为生物洗油菌；本发明混合菌剂能将油从油砂表面分离开来，洗油后油砂洁净、松散，有防止原油再粘附的作用，具有十分优异的洗油效果。